ПЦР диагностика. Что это такое в гинекологии, при гепатите, туберкулезе. Расшифровка анализов, как сдавать, стоимость

Популярность данного метода состоит в простоте и широте использования. Он применяется клиницистами для диагностики различных заболеваний. Позволяет быстро проводить сложные количественные и геномные исследования.

Одним из наиболее важных медицинских применений классического метода ПЦР является обнаружение микроорганизмов, которые способны вызывать патологические состояния.

Изучением женского организма занимается целый раздел медицины, называющийся гинекология. Сюда входят знания о нормальной его деятельности, а также о заболеваниях, возникающих в системе женских органов, обусловленные возрастными изменениями и патологическими процессами.

Первая в жизни консультация у гинеколога должна произойти по достижению девушкой шестнадцатилетнего возраста, либо же после первого полового контакта, если он случился ранее. Дальше посещать женскую консультацию и сдавать там анализы рекомендуют не реже одного-двух раз за год. Очень полезно также обследоваться при смене полового партнера, ведь такие «изменения» повышают риск проникновения половых инфекций.

ПЦР во время беременности

ПЦР диагностика (что это такое, описано выше) впервые может назначаться при беременности, так как является обязательной процедурой. Этот метод помогает выявить скрытые инфекции и угрозу развития пороков у плода.

Существуют заболевания инфекционного характера, которые могут негативно влиять на развитие плода, вызывая пороки, стать причиной преждевременных родов и выкидышей. Они особенно опасны в первом триместре беременности и, в большинстве случаев, являются медицинским показанием для прерывания беременности. Эти инфекции имеют общее название TORCH-комплекса.

Анализ ПЦР помогает установить наличие или отсутствие инфекции в организме беременной женщины. Зачастую проводится на этапе планирования беременности или в первом триместре. В случае положительного результата, требуется повторное проведение исследования. И только после подтверждения результатов, назначается соответствующее лечение.

Анализы на скрытые вирусные инфекции помогают выявить заболевание и предотвратить патологии развития плода. ПЦР мазок при беременности может выявить скрытую инфекцию гепатита, причем, другие методы диагностики не способны справиться с задачей. Анализ выделений организма беременной позволяет выявить наличие скрытых паразитирующих микроорганизмов, которые внешне себя не проявляют.

Герпес при беременности

Данный вирус, раз попав в тело человека, остается там навсегда. Во время снижения иммунной защиты, вирус переходит из спящей фазы в активную. Во время беременности защита иммунитета снижается, поэтому вероятность агрессии герпеса увеличивается.

Чем опасен герпес для беременных? Крайней степенью агрессии вируса является поражение внутренних органов тела. Причем, опасна любая форма герпеса оральная и генитальная. Анализ крови берут у всех беременных женщин.

Герпес способен проникать через плаценту и поражать плод. Известны случаи самопроизвольного выкидыша, гибели младенца после рождения и преждевременных родов, вызванные активностью герпеса. Малыш может заразиться во время прохождения по родовым путям матери.

Анализ полимеразной цепной реакции способен обнаружить вирус герпеса даже в малых количествах в слизистых оболочках органов, а также установить его вид оральный/генитальный.

Диагностику на наличие герпеса необходимо проводить в следующих случаях:

• перед планированием оплодотворения;
• при предшествующих новому зачатию выкидышах;
• при наличии высыпаний на наружных половых органах;
• при определении причин бесплодия.

В случае хронического течения инфекции анализ позволит установить степень опасности заражения вирусом полового партнера.

Цитомегаловирус

Особенно опасной считается цитомегаловирусная инфекция, попавшая в тело матери в первые 10 недель формирования плода. Нередко цитомегаловирус приводит к прерыванию беременности и выкидышу.

Инфицирование в срок от трех месяцев до полугода приводит к различным отклонениям в развитии плода, замедлению роста и дисплазии внутренних органов. Заражение на последних месяцах вынашивания приводит к поражению органов ребенка, которое можно увидеть уже после рождения.

Устранить цитомегаловирусную инфекцию невозможно, однако, сдержать ее активную форму удается с помощью курса терапии. Беременным назначают медикаменты, способствующие укреплению иммунной системы: в этом случае организм сам борется против агрессии вируса.

Передается вирус разными способами:

• в организм матери вирус попадает при общении с зараженным человеком и во время полового контакта;
• от матери плоду бактерии передаются через плаценту, в процессе родов и при грудном вскармливании.

Цитомегаловирус может проявить себя через два месяца после проникновения в тело женщины, симптомы похожи за простудное заболевание:

• гипертермия и озноб;
• головные боли;
• бронхит и кашель;
• боли в мышцах и костях.

Нельзя приписывать расстройство здоровья беременной ее особому состоянию. Нельзя назначать лечение самостоятельно без консультаций с гинекологом. Проявления заболеваний могут носить одинаковый характер, но различную этимологи.

К мерам защиты от цитомегаловируса относится:

• защищенный секс с постоянным партнером;
• использование индивидуальной посуды;
• использование индивидуальных предметов личной гигиены;
• дозированная физическая нагрузка на организм;
• сбалансированная диета, прием витаминов;
• позитивный настрой и прогулки на улице.

ПЦР мазок на цитомегаловирус способен защитить мать и плод от тяжелых последствий развития недуга.

ПЦР для диагностики ВПЧ

Метод ПЦР помогает выявить вирусы, бактерии и грибки.

Наиболее распространённые болезни, которые можно диагностировать с его помощью:

• инфекционные неврологические заболевания (менингит, миелит);
• злокачественные процессы (лейкемия, лимфома);
• вирусные заболевания (ВИЧ, вирус папилломы человека, цитомегаловирус, энтеровирус, вирусные гепатиты, краснуха, аденовирусы и др.);
• бактериальные инфекции;
• заболевания, передающиеся половым путём (уреплазмоз, хламидиоз, трихомониаз);
• заболевания, вызванные грибками (кандидоз, микоплазмоз);
• герпес;
• болезнь Филатова;
• туберкулёз, пневмония, дифтерия как вирусного, так и бактериального происхождения;
• болезни желудка, спровоцированные хеликобактерной инфекцией и другие.

Метод ПЦР для диагностики ВИЧ-инфекции является дорогостоящим анализом и используется по особым показаниям. К ним относится донорство, а также он может быть назначен пациентам, пострадавшим в автомобильной аварии с людьми, носителями ВИЧ.

ПЦР помогает установить наличие инфекции на ранних сроках до того, как организм выработает антитела к ВИЧ. Результат с высоким процентом вероятности исследование может показать уже через 5-14 дней после проникновения вируса.

В других случаях наличие вируса в организме человека помогает установить имунноферментный анализ (ИФА). Он определяет антитела к ВИЧ в крови человека, которые начинают вырабатываться через 1-3 месяца после заражения. Количественное определение анализ микроорганизмов необходимо для контроля лечения пациентов.

Вирусный гепатит С является тяжёлым заболеванием, которое может привести к развитию цирроза печени. В инкубационный период, который может составлять до 12 месяцев, вирус никак себя не проявляет, пациент практически не заразен, и вирус невозможно определить по обычному анализу крови.

Чаще всего, при несвоевременном лечении, заболевание переходит в хроническую форму и грозит множественными осложнениями.

При заражении гепатитом В, инкубационный период не так продолжителен и первые симптомы могут наблюдаться уже через 4 недели. Именно в этот период ИФА может показать присутствие вируса в организме.

Метод ПЦР позволяет:

• выявить болезнь на этапе инкубационного развития;
• разрешить сомнительные анализы других исследований;
• оценить эффективность противовирусной терапии.

Отсутствие ДНК-вируса гепатита после проведённого лечения – признак его эффективности.

Диагностика на ВПЧ проводится в случае наличия симптомов заболевания таких как, папилломы и бородавки в области половых органов. Также исследование назначается на этапе планирования беременности, в случае бесплодия, выкидышей, а также в ситуации заражения одного из партнёров, так как один из механизмов передачи вируса – половой.

Наиболее опасным является не само присутствия вируса в организме, а его тип. Некоторые его виды (16 и 18) являются высокоонкогенными и могут вызывать рак шейки матки у женщин. Метод ПЦР может назначаться совместно с другими видами исследования. Для анализа чаще всего используют мазок из половых органов. Кровь, моча и выделения из влагалища в качестве биоматериала используются крайне редко.

В большинстве случаев ПЦР диагностика предоставляет высокоточные результаты. Но в некоторых случаях для подтверждения правильности диагноза требуются дополнительные методы исследования.

ПЦР диагностика производится в частных клиниках и лабораториях по назначениям врача или по инициативе самого пациента с целью профилактики.

Предпочтение следует отдавать клиникам и лабораториям с современным оборудованием, которые существуют не первый год на медицинском рынке и зарекомендовали себя.

Заболевания ЖКТ имеют разнообразный характер, но общие симптомы. Эффективность терапии напрямую зависит от точного определения возбудителя. Чтобы выявить наличие инфекции, применяют диагностику полимеразной цепной реакции.

В некоторых случаях проводят ПЦР диагностику каловых масс. Для точности анализа материала необходимо учесть следующие рекомендации:

• прекратить использование слабительных средств за трое суток до сдачи биоматериала;
• прекратить прием медикаментов, которые могут повлиять на характеристики каловых масс.

Не следует специально омывать анус перед взятием материала, в том числе, использовать душистые моющие средства. Массу нужно взять стерильной ватной палочкой и положить в контейнер. Недопустимо попадание урины в контейнер, также недопустимо использование клизмы для опорожнения.

Преимущество полимеразной цепной реакции в определении диагноза заболеваний ЖКТ:

• выявление ДНК гельминта;
• выявление типа возбудителя;
• определение наличия вируса даже по одной молекуле ДНК.

Точность диагноза заболевания позволяет назначить эффективный курс терапии для устранения болезни.

Цена анализов ПЦР на 12 инфекций во многом зависит от опыта врачей, качества реактивов и лабораторного оборудования. Новейшая аппаратура работает быстрее и точнее, поэтому стоимость ПЦР анализа получится более высокой, но и результат будет заслуживать доверия. Поэтому лучше сразу обращать внимание на такие крупные медицинские центры и клиники, как наша – с новым и современным оборудованием, системой контроля качества, а также профессиональным составом лаборантов и врачей высшей категории.

ПЦР относится к сверхчувствительным методам диагностики. Она позволяет получать точные результаты исследования в самые короткие сроки после взятия образца. С помощью данного метода специалистам удается диагностировать наличие возбудителей, которые могут присутствовать в организме пациента, не прибегая к трудоемким микробиологическим методам.

Кроме того, при помощи ПЦР диагностики можно определить возбудителя инфекции в инкубационный период, когда отсутствуют внешние проявления заболевания. Это дает возможность своевременно начать лечение. ПЦР диагностика является довольно актуальной в урологии и гинекологии, особенно при выявлении инфекций, передающихся половым путем.

Кроме медицинской диагностики, ПЦР применяется в таких ситуациях:

• в криминальных расследованиях;
• для установления родства;
• в персонализированной медицине;
• для клонирования генов;
• в мутагенезе.

В криминалистике ПЦР применяется с целью определения так называемых генетических отпечатков. Материал, отобранный на месте событий, сравнивают с материалом обвиняемого. Для анализа применяют любую биологическую жидкость кровь, сперму, мочу, слюну, а также фрагменты тканей волосы, эпителиальные клетки.

Отцовство устанавливают, проводя несколько сравнений, что объясняется уникальностью генетической информации.

Предварительное генотипирование, применяемое в персонализированной медицине, позволяет установить наличие рецепторов и степень их чувствительности к лекарствам. Это существенно упрощает выбор медикаментозных средств для конкретного пациента. Метод эффективен по отношению к пациентам, у которых восприимчивость фармакологических препаратов обусловлена генетическими особенностями.

Применяя клонирование генов, ученым удается получить большое количество одинаковых участков ДНК. В дальнейшем их применяют в генной инженерии. Проведение мутагенеза при помощи ПЦР получило широкое распространение в экспериментальной медицине, селекционной деятельности, при производстве медицинских препаратов.

Об особенностях подготовки в каждом конкретном случае пациента информирует лечащий врач. Но есть несколько общих принципов, которые следует соблюдать всем пациентам, направленным на ПЦР.

Обследование необходимо проводить до начала приема антибактериальных препаратов. За 2-3 суток до взятия материала нужно воздержаться от половых контактов. В это же время нельзя применять контрацептивы местного действия, противомикробные вагинальные свечи и таблетки, спринцевания. После кольпоскопии, гинекологического осмотра, вагинального УЗИ должно пройти не менее трех суток. Оптимально, если мазок будет взят в середине цикла. И женщинам, и мужчинам, нельзя мочиться за три часа до обследования.

Диагностика инфекций методом ПЦР начинается с забора специалистом материала, который подлежит исследованию. Его помещают в специальный небольшой контейнер с физиологическим раствором и направляют в специальную лабораторию – ПЦР.

Суть ПЦР диагностики заключается в амплификации процессе воссоздания большого числа копий ДНК. Построение ДНК происходит по принципу комплементарности. Что это значит? ДНК состоит из четырех нуклеотидов аденина, тимина, гуанина, цитозина. Из-за особенностей химического строения аденин может соединяться только с тимином, гуанин с цитозином. ДНК каждого организма индивидуальна. Обнаружив небольшой ее участок, можно с уверенностью установить, кому именно он принадлежит.

Исследование в лаборатории проходит в несколько этапов:

• выделяется ДНК;
• ДНК фрагменты амлифицируются;
• проводится детекция ДНК-продуктов амплификации.

Если рассматривать очень упрощенно, то весь ход ПЦР диагностики заключается в следующем. Вначале ДНК-матрицу, то есть ту ДНК, которую нужно идентифицировать, нагревают до определенной температуры. Это нужно для того, чтобы двуспиральная молекула распалась на отдельные цепи. Данная фаза называется денатурацией.

Следующая фаза диагностики отжиг. После денатурации исследователь получает отдельные цепи молекулы ДНК. Затем температуру снижают. К началу и концу цепочки присоединяются праймеры короткие фрагменты нуклеиновых кислот. Они обозначают начало и конец участка, который нужно амплифицировать.

После этого начинают свою работу ферменты полимеразы. Они строят недостающую часть молекулы таким образом, что на выходе исследователь получает типичную двуспиральную молекулу нуклеиновой кислоты. Этот процесс, называемый репликацией, осуществляется по правилу комплементарности, о котором упоминалось выше. Это последняя фаза ПЦР элонгация.

Затем следует этап идентификации ДНК. Это и есть диагностика инфекции. Она осуществляется при помощи электрофореза или меченных праймеров. В первом случае нити ДНК линизируют, то есть, «раскручивают» спираль, чтобы она приобрела линейную форму. Под воздействием электрического поля молекулы способны мигрировать от катода электрода, заряженного отрицательно, к аноду электроду, заряженному положительно.

Анализ крови

ПЦР диагностика (что это такое, объясняется молекулярной биологией) является методом молекулярного клонирования, используемого для анализа короткой последовательности ДНК, которая присутствует в минимальных количествах в образцах, содержащих какой-либо генетический материал. Этот метод часто называют «копировальным аппаратом ДНК».

ПЦР диагностика осуществляется in vitro (вне тела) в лаборатории и основана на естественном процессе удвоения ДНК перед её делением. Кроме возможности обнаружить вирус, бактерию или другие микроорганизмы в образце, ПЦР позволяет идентифицировать их количество.

При таких заболеваниях, как заражение вирусом гепатита С или вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), вирусная нагрузка является хорошим показателем того, на каком этапе находится заболевание и насколько эффективной является терапия.

Вооруженные этой информацией, врачи могут определить, когда следует начинать лечение, а также контролировать сам процесс. Это позволяет составить индивидуальный подход для каждого пациента.

ПЦР диагностика включает три этапа, в каждом из которых количество ДНК-мишени увеличивается в разы. В результате такой реакции получается более одного миллиарда копий исходной или «целевой» ДНК, что и позволяет оценить присутствие вируса в организме. Это и является основным свойством метода ПЦР.

Особенности подготовки к исследованию зависят от биоматериала, который сдаётся. Также следует помнить о том, что необходимо исключить приём антибиотиков и других медикаментозных средств. Для контроля эффективности лечения следует выдержать интервал после приёма препаратов не менее 4 недель.

Кровь сдаётся с утра натощак. Моча и кал должны быть помещены в предназначенный для этого, абсолютно стерильный контейнер. При этом, перед сбором мочи необходимо провести гигиену внешних половых органов.

Если сдаётся мазок, необходимо:

• не мочиться в течение 3-х часов;
• не рекомендуется подмываться и спринцеваться накануне (для женщин);
• за сутки прекратить половую жизнь;
• женщинам мазок следует сдавать в середине цикла.

Развитие туберкулёза провоцирует палочка Коха, которая может попасть в организм человека воздушно-капельным путём. Заболевание имеет две формы: скрытую и открытую. В первом случае инфицированный человек не является носителем инфекции и микобактерии в мокроте не выявляются даже при помощи ПЦР. Опасность эта форма всё же имеет, так как способна переходить в открытую стадию.

Открытая (активная) стадия представляет опасность для окружающих даже в случае строгого соблюдения правил личной гигиены. Для диагностики заболевания используют флюорографию, томографию и рентген грудной клетки. Также с этой целью применяют кожную туберкулированную пробу (пробу Манту). Но наиболее эффективным методом исследования является ПЦР.

В качестве исследуемых образцов используют:

• кровь;
• мокроту;
• жидкость бронхов.

После проведения анализа методом ПЦР может быть озвучен положительный или отрицательный результат.

В случае положительного результата, рекомендуется повторная сдача анализов и количественное исследование ПЦР. Это помогает определить концентрацию инфекции в организме с целью назначения правильного лечения.

Этот метод диагностики отличается высокой стоимостью. Его цена колеблется от 200 до 500 рублей за каждый вид. Комплексное обследование на наличие нескольких инфекций позволяет значительно сэкономить, по сравнению с оплатой каждого отдельного исследования.

Срок проведения исследования зависит от типа инфекции и может занять от 1 до 5 дней. Также эти показатели зависят от оснащённости лаборатории и квалификации медицинского работника.

ПЦР диагностика (о том, что это такое, подробно описано в данной статье) является наиболее точным и быстрым методом исследования. Она является одним из важнейших открытий в ХХ ст. в области медицины.

Благодаря этому методу стало возможным полное излечение от многих болезней. Но не стоит забывать о том, что ПЦР имеет и некоторые недостатки, и его эффективность иногда повышается совместно с использованием других методов исследования.

Оформление статьи: Владимир Великий

Если у пациентки имеются характерные признаки вируса папилломы человека, на слизистых оболочках или кожных покровах, ей могу назначить анализ крови на ВПЧ у женщин. Биологический материал для исследования берут из вены. Далее выполняют анализ путем проведения полимеразной цепной реакции.

Также есть еще возможность определить вирус с помощью ИФА (иммуноферментный анализ), однако он не является высокоточным. Дело в том, что если на момент проведения диагностики патологических микроорганизмов незначительное количество, то тест будет отрицательным и заболевание не будет выявлено.

ПЦР, или полимеразная цепная реакция – вид лабораторного исследования, помогающего выявить в биоматериале пациента наличие внутренней структуры ДНК различных микроорганизмов, в частности возбудителей инфекции. Этот вид диагностики широко распространен благодаря своей точности, возможности работы с любым биоматериалом и высокой чувствительности.

Сдача анализов ПЦР на 12 инфекций проходит следующим образом:

1. С помощью специального одноразового зонда в стерильную пробирку помещают исследуемый биоматериал (чаще всего кровь либо мазок) из тех органов пациента, которые необходимо проверить на наличие инфекций. Это могут быть органы мочеполовой системы, ротовая полость и любой другой участок организма.
2. Полученный биоматериал отправляется в лабораторию, где его помещают в специальный аппарат с добавлением ферментов и подвергают многократному синтезу. Происходит увеличение количества копий ДНК микроорганизмов в тысячи раз, после чего их сравнивают с эталоном возбудителя инфекции, уже содержащимся в базе лаборатории.
3. В тот же день, либо спустя 1-2 суток будут готовы результаты исследования. Расшифровка ПЦР следующая: если анализ показал, что обнаруженные ДНК совпадают с ДНК эталона, то результат диагностики объявляется положительным («Обнаружено»), а в противном случае – отрицательным («Не обнаружено»). Иногда при положительном результате врач-лаборант определяет еще и количественные характеристики – концентрацию возбудителей в организме пациента, например, при обнаружении вируса гепатита.

Ограничивать рацион перед сдачей ПЦР-анализа необязательно, но кое-какая подготовка все же требуется: например, следует прекратить прием некоторых медицинских препаратов и прохождение лечебных терапий. Подробнее об этом в каждом конкретном случае расскажет лечащий врач.

Отрицательный результат при диагностике инфекций методом ПЦР указывает, что исследуемый материал не имеет никаких следов инфекционных агентов. Соответственно, пациент, сдавший анализы, является здоровым. Положительный результат полимеразной цепной реакции указывает на наличие следов инфекции в исследуемой пробе.

Случается, что результат ПЦР диагностики инфекций оказывается положительным, но активной инфекции в организме пациента нет. Такой случай говорит о «здоровом носительстве», которое не требует и не поддается лечению.

Для этого обращайтесь к разделу сайта «Где сдать анализы».

Окончательный результат готов через 1,5-2х суток после сдачи материала. В некоторых случаях результат готов в первый же день.

Методы лечения в гинекологии

Дамы, которые пренебрегали советом и не обследовались периодически у гинеколога могут довести свое женское здоровье до осложненного состояния. В этом случае им придется приготовиться к очень сложному процессу лечения, который проходит в несколько ступеней.

Последовательность терапии включает в себя: ослабевание и дальнейшее устранение патологического процесса в половой системе, профилактика повторного развития заболевания или обострения и восстановительные мероприятия для реабилитации организма.

Лечение может быть консервативным и оперативным. Что требуется конкретной пациентке, может определить только высококвалифицированный врач на основании диагностики и результатов исследований.

Если назначается медикаментозное лечение, то это могут быть антибиотики, гормональные препараты, средства, обеспечивающие остановку кровопотери и снижение болезненных ощущений.

Еще к консервативным методам относят немедикаментозную терапию, основывающуюся на лечебных массажах, диетотерапии, физкультуре, психо- и климатотерипии, лазеротерапии и т.п.

Когда речь идет о хирургии, то подразумевается один из способов:

• Выскабливание полости матки;
• Криодеструкция;
• Иссечение или прижигание током;
• Удаление кист;
• Искусственный аборт.

Показания

Проводить ПЦР диагностику инфекций пациентам необходимо в следующих случаях: